ELISA实验通用规则
1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
4、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
5、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
6、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、实验时,要使底物避光保存。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
11、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
ELISA试剂盒实验中需留心下列的细节:
1. 严格按照规定的时刻和温度进行温育以保证成果。一切试剂都必须在运用前到达室温20-25℃。运用后当即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确能够导致不的成果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔枯燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的色彩,现已变蓝的底物液不能运用。
5. 防止试剂和标本的穿插污染以免形成错误成果。
6. 在储存和温育时防止强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反响试剂不能触摸漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会损坏试剂盒中反响试剂的生物活性。
9. 不能运用过期产品。
10. 假如可能传播疾病,一切的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测设备。