在搜集样本前都有必要有一个完好的方案,有必要清楚要检测的成份是否满足安稳。对搜集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用,关于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用,标本应防止重复冻融。
液体类标本: 包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培育上清等。
1. 细胞培育上清:检测分泌性的成份时,用无菌管搜集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清。
2. ELISA试剂盒培育细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。经过重复冻融或参加安排蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份,离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
3. 安排标本:切开标本后,称取分量,参加一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷冻保存备用。标本消融后依然坚持2-8℃的温度,参加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取试剂, 用手艺或匀浆器将标本匀浆化,离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,分装后一份待检测,其他冷冻备用。
4. 血清:室温血液自然凝结10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
5. ELISA试剂盒血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
6. 尿液:用无菌管搜集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保存过程中如有沉积构成,应再次离心,胸腹水、脑脊液参照此实施。